Clonage et caractérisation d’une profiline (Pru du 4), un allergène croisant de l’amande (Prunus dulcis). : Pallavi Tawde, MSa, Yeldur P. Venkatesh, PhDad, Fang Wang, PhDa, Suzanne S. Teuber, MDc, Shridhar K. Sathe, PhDb, Kenneth H. Roux, PhDa
a From the Department of Biological Science and Institute of Molecular Biophysics
b Department of Nutrition, Food and Exercise Sciences, Florida State University
c Department of Internal Medicine, Division of Rheumatology, Allergy, and Clinical Immunology, University of California
d Department of Biochemistry and Nutrition, Central Food Technological Research Institute, Mysore (present work conducted at Florida State University)
dans JACI Volume 118, Issue 4, Pages 915-922 (October 2006)
– Contexte :
- On ne connait pas complètement l’identité des protéines allergéniques d’amande.
– Objectif :
- Notre objectif était de caractériser la réactivité IgE de patients vis à vis d’un allergène recombinant d’amande ainsi que vis à vis de l’allergène correspondant sous forme native.
– Méthodes :
- Une bibliothèque de cDNA d’amande a été screenée avec des sérums des patients allergiques aux protéines se liant aux IgE.
- Deux clones réactifs ont été séquencés et l’un d’entre eux a été exprimé.
- L’allergène recombinant exprimé et sa contrepartie native (purifiée à partir de farine non traitée d’amande) ont été analysés par électrophorèse sur gel à une et à deux dimensions, dot blot et ELISA, et examinés sous l’angle de la réactivité croisée avec les profilines de graminées.
– Résultats :
- Les 2 clones sélectionnés (désignés par Pru du 4) codaient pour des séquences de profiline qui différaient par deux mutations silencieuses.
- En analyse dot-blot, 6 des 18 sérums patients (33%) ont réagi avec la protéine recombinante Pru du 4, tandis que 8 sur 18 (44%) ont réagi avec la forme native.
- Les résultats d’ELISA étaient identiques.
- Les profilines d’amande et d’ivraie s’inhibaient mutuellement.
- L’immunoblotting bidimensionnel a indiqué la présence de plus d’un isoforme natif de profiline d’amande.
-*La force de la réactivité des IgE sériques de quelques patients a varié selon les tests et selon la nature native ou recombinante des profilines.
– Conclusion :
- La profiline d’amande est une protéine alimentaire se liant aux IgE qui réagit de façon croisée avec les profilines des pollens de graminées et qui est susceptible de dénaturation, ayant pour résultat une réactivité variable selon les types d’analyse et selon les patients.
– Implications cliniques :
- Les IgE sériques de presque la moitié des patients allergiques testés aux amandes réagissent avec la profiline d’amande.
- Puisque la plupart des patients présentent également une pollinose, la réactivité croisée bien connue entre le pollen et les profilines alimentaires pourrait expliquer ce profil de réactivité.