Profiline de la pêche : clonage, expression hétérologue et réactivité croisée avec Bet v 2. : R. Rodríguez-Perez1, M. Fernández-Rivas1, E. González-Mancebo1, R. Sánchez-Monge2, A. Díaz-Perales2, G. Salcedo2 1Unidad de Alergia, Fundación Hospital Alcorcon, Madrid, Spain ; 2Unidad de Bioquímica, Departamento de Biotecnología, E.T.S. Ingenieros Agrónomos, Madrid, Spain
dans Allergy 58 (7), 635-640
La pêche est parmi l’aliment principal entraînant des réactions allergiques dans une population adulte méditerranéenne. Seul un seul allergène de la pêche, nommé Pru p 3 a été caractérisé. Cependant un rôle potentiel des profilines a aussi été suggéré dans l’allergie pollinique associée à l’allergie à la pêche.
– Méthode :
* Des clones complémentaires d’ADN de deux isoformes différentes de profilines de pêche ont été obtenus par polymérisation par une transcriptase reverse en utilisant des chaînes d’amorçage non dégénérées.
* L’expression des profilines recombinante de pêche a été réalisé avec Escherichia Coli, et confirmée par des anticorps poly clonaux de lapin dirigés contre la profiline de pollen de tournesol.
* 29 sera de patients ayant une allergie prouvée à la pêche par un test de provocation en double aveugle contre placebo et, soit avec (n=15) soit sans (n=14) des IgE spécifiques à Bet v 2, ont été testés à l’aide de techniques d’immuno-détection pour étudier la réactivité des profilines de pêche recombinante.
– Résultats :
* Le cADN de chaque profiline de pêche incorpore une zone de lecture ouverte codant pour une protéine de 131 AA.
* Les isoformes de la profiline de pêche, Pru p 4.01 et Pru 4.02 ont une séquence d’homologie d’AA de 80%, et sont très similaires (70% d’identité) aux profilines allergéniques d’autres plantes alimentaires ou de pollens.
* Le Pru p 4.01 recombinant est exprimé dans l’Escherichia Coli comme une protéine non fusion, exprimant la taille moléculaire escomptée et réagissant avec les anticorps anti-profilines.
* rPru 4.01 a été reconnu par tous les sérums (15 sur 15) ayant une IgE spécifique Bet v 2, alors qu’aucun sérum (0 sur 14) sans IgE aux allergènes de la pêche n’a réagit avec Pru p 4.01.
– Conclusions : La profiline de pêche Pru p 4.01 est très proche des autres profilines de plantes alimentaires et de pollens. Une corrélation complète entre la réactivité à Pru p 4 et rBet v 2 a été trouvée dans le sérum des patients allergiques à la pêche.