Tests biologiques de l’allergie moléculaire : respect de la structure secondaire.

L’aide au diagnostic apportée par l’allergologie moléculaire est indéniable.

Toutefois, il convient par bien des aspects de rester prudent et de ne pas devenir un béni-oui-oui de cette nouvelle approche.

Ainsi, des études de plus en plus nombreuses portent la réflexion sur le devenir des protéines alimentaires lors de la préparation culinaire –particulièrement la cuisson- et du cheminement dans le tractus digestif.

Par exemple, pour le kiwi, un travail expérimental montrait clairement qu’Act d 1 ne résistait pas à la cuisson alors que, dans les mêmes conditions, Act d 2 était modifié mais de façon réversible.

Nous voyons tout l’intérêt de tenir compte de ces facteurs lors de l’interprétation des résultats des publications.

Autre aspect, c’est l’objet de cette étude, représenté par les conditions dans lesquelles sont pratiqués les tests biologiques de l’IgE réactivité vis-à-vis de l’Act d 5, la kiwelline, protéine du groupe I de 28 kDa, il s’agit d’une Expansine.

Les auteurs de ce travail ont sélectionné 29 sujets présentant cliniquement une allergie au kiwi, ont extrait en natif de l’Act d 5 –il s’agit donc de nAct d 5-, ont caractérisé la structure secondaire de cette protéine grâce au spectre du dichroïsme circulaire –essentiellement une hélice alpha.

Ensuite, ils ont vérifié l’IgE réactivité au moyen des tests cutanés, de l’IgE immunoblotting et de la puce ISAC.

Le dichroïsme circulaire a permis de contrôler la structure secondaire en fonction des conditions expérimentales.

Ainsi, plus on se rapproche des conditions naturelles, milieu acide et faible polarité, mieux la structure hélicoïdale est conservée et inversement plus on s’en éloigne.

Sur les 29 sujets allergiques au kiwi, onze seulement réagissent au test cutané pratiqué avec nAct d 5 ; ce qui n’est pas illogique, tous les patients allergiques au kiwi ne réagissent pas obligatoirement à cette protéine.

Par contre, aucun de ces onze sujets ne réagissaient sur la puce ISAC.

L’IgE immunoblotting est plus performant 8 sur 9 sujets réagissent.

Nous le voyons la conformation spatiale et l’IgE réactivité d’Act d 5 du milieu utilisé pour la pratique des techniques de laboratoire jouent un rôle important.

Pour l’allergologue, ces données doivent être intégrées dans la réflexion diagnostique, il gardera donc toujours un sens critique.

Pour le biologiste, pour les producteurs de tests diagnostiques, il paraît évident de prendre en compte ces facteurs.

Ainsi, ils pourront adapter les caractéristiques physico-chimiques des solvants compte tenu des données du dichroïsme circulaire afin d’améliorer la valeur diagnostique des tests biologiques.