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« Sésame livre toi », ou les secrets du sésame percés à jour !!
mardi 30 novembre 2004, par
Le sésame fait partie de ces nouveaux allergènes alimentaires qui donnent des réactions allergiques sévères. Il est souvent caché dans des aliments ce qui explique la possibilité d’accidents même lorsqu’on fait attention à l’éviction stricte du sésame, d’autant qu’il est extrêmement utilisé dans la nouvelle cuisine.
Identification et caractérisation des épitopes linéaires reconnu par les cellules B de la bêta-globuline, un allergène majeur de la graine de sésame. : Neomi Wolff, PhD a
Shmuel Yannai, DSc a
Nathan Karin, PhD b
Ram Reifen, MD d
Uri Cogan, PhD a *
# aFrom the Department of Biotechnology and Food Engineering
# bDepartment of Immunology, Faculty of Medicine, Technion-Institute of Technology, Haifa
# cThe Faculty of Agricultural, Food and Enviromental Quality Sciences, The Hebrew University of Jerusalem, Rehovot
# dKipper Institute of Immunology, Schneider Children Medical Center, Petah-Tikva
# ePediatric Allergy and Clinical Immunology Unit, Department of Pediatrics, E. Wolfson Medical Center, Holon
# f
dans JACI November 2004 • Volume 114 • Number 5
– Introduction :
- L’augmentation de la consommation d’aliments contenant des graines de sésame est parallèle à l’augmentation du nombre de cas rapportés de réactions allergiques aux graines de sésame.
– Objectif de l’étude :
- Le but de ce travail a été d’identifier et caractériser les épitopes linéaires reconnus par les cellules B de la bêta-globuline de poids moléculaire 14 Kd, l’allergène majeur de la graine de sésame.
– Méthodologie :
- Un peptide contenant 71 acides aminés (peptide B) a été initialement identifié par cette équipe, comme étant la région qui lie l’IgE spécifique sur cette bêta-globuline.
- Pour déterminer la séquence d’acides aminés du site de liaison de l’IgE sur le peptide B, les auteurs ont synthétisé des peptides de 20 à 10 acides aminés de long recouvrant partiellement la taille totale du peptide B, avec des zones de recouvrement les uns par rapport aux autres respectivement de 10 à 2 acides aminés.
- Le sérum de 20 patients ayant une allergie à la bêta-globuline de sésame a servi à identifier les épitopes en utilisant le test du dot-blot.
– Résultats :
- Au final, 9 sites différents de reconnaissance des IgE ont été identifiés sur le peptide B.
- 3 d’entre eux, les 2, 3 et 13 (correspondant respectivement aux acides aminés 46-55, 48-57, et 76-86 au niveau de la séquence de bêta globuline), apparaissent comme les épitopes immuns dominants des épitopes de liaison des IgE.
- De plus, ces peptides sont les mieux reconnus en terme d’intensité de réponse.
- Il n’y a pas de façon claire de motifs de séquence partagés par les 9 épitopes différents de liaison aux IgE de la bêta-globuline.
- Cependant, environ 60% des acides aminés représentés au niveau des épitopes sont des résidus hydrophobes.
– Conclusion :
- L’identification des épitopes de liaison des IgE permet de mieux comprendre le rôle fonctionnel des allergènes dans ces affections allergiques, et pourrait avoir des implications en immuno-diagnostic et probablement en vue d’une immunothérapie.
Les auteurs ont caractérisé les sites de liaison des IgE au niveau de l’allergène majeur du sésame.
Ils ont identifié 3 séquences qui sont autant de sites de liaisons avec une forte intensité. Cependant il n’y a pas, à première vue, d’homologie entre ces différentes séquences même s’il y a 60% de résidus hydrophobes.
Il s’agit d’un travail très fondamental qui est indispensable pour développer de nouveaux tests biologiques concernant la mise en évidence de l’allergie au sésame, mais aussi pour envisager ultérieurement une éventuelle immunothérapie spécifique.
L’étape d’identification d’un allergène repose sur la mise en évidence de ses épitopes.
Ici, les auteurs ont déterminé les séquences peptidiques d’accrochage des IgE spécifiques. Ils ont utilisé la technique du dot blot. Un anticorps spécifique est utilisé pour révéler la présence d’une protéine sur une membrane après un transfert à partir d’un gel (SDS ou de focalisation isoélectrique) ou directement sur une membrane. On parle alors de western blot (un jeu de mots sur la technique du Southern blot, développée par le Dr Southern). Ici on parle de dot blot parce que le dépôt de la protéine sur la membrane se fait à l’aide d’un masque n’exposant que de petites parties de la membrane, avec des trous de forme ronde (dot blot).
Les résultats montrent qu’il existe plusieurs sites ce qui complique les choses puisque les IgE peuvent reconnaître plusieurs épitopes.
Il n’y a donc pas un site unique. La réponse allergique est donc ici aussi poly clonale.
Le problème maintenant est qu’en réalité un épitope est une structure tridimensionnelle et qu’il faut donc vérifier que les sites immunologiques correspondent bien aux sites allergiques qui eux ne sont pas linéaires.
Il est possible que tous les peptides isolés, bien que reconnus par les IgEs, n’aient pas tous la même valeur allergique clinique.
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