Fabrication d’une hévéine ayant une diminution de son allergénicité par commutation de 6 résidus d’acides aminés au niveau des épitopes conformationnels des IgE, pour une désensibilisation dans l’allergie au latex. : Karisola P, Mikkola J, Kalkkinen N, Airenne KJ, Laitinen OH, Repo S, Pentikainen OT, Reunala T, Turjanmaa K, Johnson MS, Palosuo T, Kulomaa MS, Alenius H.
Department of Biological and Environmental Science, University of Jyvaskyla, Jyvaskyla, Finland. Finnish Institute of Occupational Health, Helsinki, Finland. Institute of Biotechnology, University of Helsinki, Helsinki, Finland. A.I. Virtanen Institute, Department of Biotechnology and Molecular Medicine, University of Kuopio, Kuopio, Finland. Department of Biochemistry and Pharmacy, Abo Akademi University, Turku, Finland. University Hospital of Tampere, Tampere, Finland. National Public Health Institute, Helsinki, Finland
dans J Immunol. 2004 Feb 15 ;172(4):2621-2628
Récemment, cette équipe a montré que le fragment Fab des IgE se fixait sur des épitopes conformationnels des régions N et C terminales de l’allergène majeur du latex naturel, l’hévéine (Hev b 6.02).
– Objectif de l’étude :
- Pour identifier les résidus importants dans cette interaction avec les IgE, la séquence de l’hévéine a été scannée en réalisant des mutations du site de liaison spécifique.
- 29 mutants d’hévéine ont été réalisés et produits par génie génétique et testés par inhibition d’un test ELISA à partir du sérum de 26 patients allergiques au latex.
- 6 résidus d’hévéine interagissant de façon critique avec les IgE ont été identifiés : Arg(5), Lys(10), Glu(29), Tyr(30), His(35),et Gln(38), et ont été caractérisés de façon plus précise.
- Sur la base de ces 6 résidus, 2 triples mutants (HDelat3A, HDelta3B) et un mutant de l’hévéine où les 6 résidus ont été mutés (HDelta6) ont été fabriqués et produits.
- Les propriétés fonctionnelles et structurales de 6 mutants ont été comparées expérimentalement ainsi qu’avec l’hévéine recombinante.
– Résultats :
- L’affinité de la liaison à l’IgE diminue par 3 à 5 avec les mutants par rapport à l’hévéine recombinante.
- La réactivité du test cutané en prick du triple mutant HDelta3A est très fortement diminuée, et la réactivité du mutant des 6 résidus HDemta6 est complètement abolie chez tous les patients étudiés dans cette étude.
– L’approche expérimentale présentée dans cet article offre des éléments pour l’identification et la modification des acides aminés au niveau des sites conformationnels des épitopes des allergènes qui interagissent avec les IgE.
– L’hévéine ayant une forte diminution de sa capacité de liaison avec les IgE pourrait ainsi offrir une molécule utile pour l’immunothérapie dans l’allergie au latex car ayant beaucoup moins de risque d’entraîner des effets systémiques.