Des mutants hypoallergéniques d’Ole e 1, l’allergène majeur du pollen d’Olivier, candidats vaccins pour l’immunothérapie. : E. G. Marazuela, R. Rodríguez, D. Barber, M. Villalba, E. Batanero
Departamento de Bioquímica y Biología Molecular, Facultad de Química, Universidad Complutense, Madrid, Spain and Departamento de I+D, ALK-Abelló, Madrid, Spain
dans Clinical & Experimental Allergy (OnlineEarly Articles).
– Contexte :
- L’extrémité C-terminale d’Ole e 1, un allergène majeur du pollen d’olivier, est un site IgE-réactif dominant et offre une cible pour que la mutagénèse dirigée produise des variants avec des capacités de liaisons réduites vis-à-vis des IgE.
– Objectif :
- Évaluer les propriétés immunogènes in vitro et in vivo de 3 dérivés d’ Ole e 1.
– Méthodes :
- 3 mutants (une mutation ponctuelle pour Y141A et deux délétions, 135 Δ 10 et 140 Δ 5) ont été produits par mutagénèse dirigée de l’ADNc spécifique d’Ole e 1 et produits par Pichia pastoris.
- Les mutants d’Ole e 1 ont été analysés pour leur réactivité IgE par ELISA avec des sérums de patients allergiques au pollen d’olivier.
- Leur allergénicité a été également étudiée dans un modèle d’allergie chez la souris et par des tests d’activation des basophiles.
- La réponse IgG1 a été évaluée par immunoblotting et ELISA compétitive.
- La réactivité des cellules T a été évaluée par des tests de prolifération et de production de cytokine dans des cultures de splénocytes.
– Résultats :
- Le mutant 135Δ 10 a montré la plus forte réduction des possibilités de liaison avec les IgE des sérums des patients allergiques au pollen d’olivier.
- Les tests de basophiles de leucémie de rat ont identifié le mutant 135Δ 10 comme variant avec la plus basse capacité de libération de β-hexosaminidase.
- En outre, le même mutant 135Δ 10 a induit les niveaux d’IgE les plus bas dans un modèle de sensibilisation de souris BALB/c.
- Tous les mutants d’Ole e 1 ont maintenu leur réactivité des cellules T, spécifique de l’allergène.
- L’immunisation de souris avec les mutants a induit des anticorps IgG1, qui ont réagi de façon croisée avec Ole e 1 et les allergènes Ole e 1-like comme ceux des pollens de Frêne, de lilas et de Troëne.
- La capacité des IgE humaines de bloquer la liaison des anticorps IgG1 anti-mutant d’Ole e 1 de la souris avec Ole e 1 naturel a démontré que les mutants Ole d’e 1 peuvent induire les anticorps in vivo réactifs à l’allergène normal.
– Conclusion :
- Le mutant 135Δ 10, avec une allergénicité réduite, une réactivité cellulaire T intacte et la capacité d’induire des anticorps bloquants pourrait fournir un candidat vaccin approprié pour une thérapie efficace et plus sûre de l’allergie au pollen d’Olivier.