Clonage moléculaire et expression fonctionnelle des protéines sarcoplasmique de la crevette. : Mita H, Koketsu A, Ishizaki S, Shiomi K.
Source
Department of Food Science and Technology, Tokyo University of Marine Science and Technology, Minato-ku, Tokyo, 108-8477, Japan.
dans J Sci Food Agric. 2013 May ;93(7):1737-42. doi : 10.1002/jsfa.5961
– Introduction :
- Les protéines sarcoplasmiques de transport du calcium (Calcium-binding proteins, SCP) ont été récemment décrites comme des allergènes des crustacés.
- Cependant, les connaissances de leur structure primaire sont limitées, ne permettant pas la production d’un recombinant utilisable à la place des SCP naturelles (nSCP).
– Objectifs de l’étude :
- Ils ont été de :
- caractériser la structure primaire des SCPs de 2 espèces de crevettes du genre Penaeus (black tiger et kuruma) par clonage de l’ADNc,
- et de produire une recombinant (rSCP) de la « black tiger », ayant une réactivité IgE identique à la nSCP.
– Résultats :
- La totalité des ADNc de la crevette « black tiger » et de la crevette « kuruma » a été clonée avec succès.
- Les 2 SCPs sont composées de 193 résidus d’acides aminés et montrent 80% d’homologie de séquence avec des SCPs connues de crustacées.
- La SCP de la crevette « black tiger » a été exprimée dans Escherichia coli et a permis la production de rSCP, et les tests ELISA et l’inhibition de l’ELISA montrent que cette rSCP obtenues a la même réactivité que la SCP naturelle.
– Conclusion :
- Ces résultats démontrent une forte identité de séquence des SCPs entre les différents crustacés.
- De plus, le rSCP pourrait être un outil intéressant pour étudier les allergènes des crustacés et pour faire le diagnostic d’allergie aux crustacés.
