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Combine et recombine pour les spécialistes du transfert : il ne s’agit pas de foot mais de LTP !!
vendredi 15 juillet 2005, par
Le domaine des allergies croisées est en pleine expansion, soulevant des questions passionnantes pour les allergologues avec des implications majeures pour les patients allergiques. Mais pour cela il faut disposer de nouveaux outils biologiques, en particulier des recombinants des protéines de transfert lipidique.
Protéines de transfert lipidiques (LTP) de fruits : clonage, expression et quantification : Laurian Zuidmeera, W. Astrid van Leeuwena, Ilona Kleine Buddea, Jessica Cornelissena, Ingrid Buldera, Ilona Rafalskaa, Noèlia Telléz Besolía, Jaap H. Akkerdaasa, Riccardo Aserob, Montserrat Fernandez Rivasc, Eloina Gonzalez Manceboc, Ronald van Reea
aDepartment of Immunopathology, Sanquin, Amsterdam, The Netherlands ;
bAmbulatorio di Allergologia, Ospedale Caduti Bollatesi, Bollate (MI), Italy ;
cAllergy Unit, Fundación Hospital Alcorcón, Madrid, Spain
dans International Archives of Allergy and Immunology 2005 ;137:273-281
– Introduction :
- Les LTP sont des allergènes stables, pouvant entraîner des réactions graves, et rencontrées dans les fruits et dans de nombreux autres végétaux alimentaires.
– Objectif de l’étude :
- Il a été de cloner et faire exprimer une LTP recombinante de pomme (Mal d 3) comme cela a déjà été fait pour la LTP de la pêche (Pru p 3)
- et de mettre au point des tests quantitatifs pour mesurer les LTP des fruits.
– Méthodologie :
- L’ADNc de Mal d 3 et Pru p 3 ont été clonés puis exprimés, et les protéines produites ont été purifiées par échange cationique par chromatographie.
- La réactivité immunologique de rMal d 3 a été comparée à celle de nMal d 3 par RAST inhibition, immunoblott et tests de libération d’histamine par les basophiles.
- Pour obtenir des anticorps monoclonaux et polyclonaux monospécifiques, des souris et des lapins ont été immunisés avec nMal d 3 purifiés.
– Résultats :
- La séquence d’acides aminés déduite de Mal d 3 est identique à celle publiée, avec une différence de Pru p 3 en 2 positions : S9A et S76H.
- Le r Mal d 3 a un potentiel de liaison à l’IgE et une l’activité biologique analogue à la molécule naturelle.
- Un test sandwich ELISA a détecté de façon sélective la LTP de la pomme, et un autre a été créé pour détecter une réaction croisée avec la cerise, la nectarine et la noisette.
- De plus, un test de compétition a été développé avec l’antisérum polyclonal de lapin et identifie nMal d 3.
– Conclusion :
- R Mal d 3 comme cela a déjà été fait pour rPru p 3 pourrait être un outil utile avec des applications dans le diagnostic allergologique en allergie alimentaire.
- Des méthodes de mesures de la LTP permettront de mieux repérer ces allergènes potentiellement dangereux et d’augmenter leur traçabilité.
Dans ce travail, les auteurs ont, par génie génétique, mis au point un recombinant de la LTP : Mal d 3.
Les différents tests biologiques ont confirmé le potentiel réactif de cette molécule qui peut fixer les IgE spécifiques, avec une activité biologique analogue à la protéine naturelle.
Ce travail est important car il va permettre de développer de nouveaux recombinants qui sont indispensables pour l’exploration des allergies croisées dans le domaine des allergies alimentaires aux végétaux comestibles.
Les auteurs se sont inspirés des mêmes techniques déjà utilisées pour produire une protéine recombinante de Pru p 3.
La mise au point de tests comme le test ELISa devrait permettre de mettre en évidence cette protéine de transfert dans les différents fruits et d’aider ainsi à reconnaître les aliments qui ont éventuellement une allergie croisée.
Nul doute que ces études vont permettre de beaucoup mieux préciser les allergènes en cause chez les patients ayant à la fois une pollinose et une allergie alimentaire.
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