Phl p 3 : caractérisation structurelle et immunologique d’un allergène majeur de la Phléole. : Arnd Petersen*, Roland Suck+, Buko Lindner, Dessi Georgieva§, Martin Ernst¶, Holger Notbohm||, Daniel Wicklein*, Oliver Cromwell+ and Wolf-Meinhard Becker*
*Molecular and Clinical Allergology, Research Center Borstel, Borstel, Germany, +Allergopharma Joachim Ganzer KG, Reinbek, Germany, Biophysics, Research Center Borstel, Borstel, Germany, §Center of Experimental Medicine, Institute of Biochemistry and Molecular Biology I, University Hospital Hamburg-Eppendorf, c/o Deutsches Elektronen Synchrotron (DESY), Hamburg, Germany, ¶Immune Cell Analytics, Research Center Borstel, Borstel, Germany and ||Department of Medical Molecular Biology, University of Luebeck, Luebeck, Germany
dans Clinical & Experimental Allergy 36 (6), 840-849.
– Contexte :
- L’importance de la pertinence des différents allergènes en matière de sensibilisation allergique n’est que partiellement comprise.
- Une compréhension plus détaillée de la structure de l’allergène et de la manière dont cette structure influe sur les réponses immunitaires pourrait conduire à un meilleur diagnostic de la maladie et à des préparations améliorées en vue d’une immunothérapie spécifique de l’allergène.
- Les pollens des Poacées contiennent plusieurs allergènes différents, et bien que les allergènes du groupe 3 aient été classés depuis longtemps, leur structure et leur allergénicité ont été peu étudiées.
– Objectif :
- Caractériser Phl p 3 du pollen de Phléole (ou Fléole) et le comparer à Phl p 2 en regard de sa structure biochimique et de son allergénicité.
– Méthodes :
- Phl p 2 et Phl p 3 naturels ont été séparés par chromatographie à partir d’un extrait de pollen et caractérisés par électrophorèse 2D et séquençage de protéines.
- Les séquences complètes ont été déterminées par clonage d’ADN et repérées dans les extraits naturels de pollens par spectrométrie de masse.
- D’autres comparaisons des allergènes ont été réalisées pour la liaison IgE et les réactivités croisées.
- L’allergénicité a été déterminée par l’activation des basophiles CD203c et les tests cutanés.
- Les structures 3D ont été comparées par modélisation moléculaire.
– Résultats :
- Phl p 3 a une masse moléculaire de 10.958 et 10.973 kDa et des pI de 8.9 et 9.3.
- Phl p 2 a une masse moléculaire de 10.816 et un pI de 4.6.
- L’identité de séquence est de 58%.
- En dépit de ces différences dans les structures primaires, les deux allergènes montrent des structures de conformation identiques, en rapport avec des propriétés immunologiques et allergologiques similaires.
– Conclusions :
- Les allergènes des groupes 2 et 3 sont des allergènes majeurs qui ont des structures tridimensionnelles similaires.
- Bien qu’ils diffèrent considérablement dans leurs séquences d’acides aminés et leurs pI, il n’y a qu’une légère différence en terme de réactivité immunologique, un peu plus forte pour Phl p 3 en regard des cellules B (épitopes conformationnels).
- Les différences entre les séquences peuvent influencer la réactivité vis-à-vis des cellules T.