Caractérisation moléculaire et immunologique d’un inhibiteur de la serine protéinase du blé : un nouvel allergène dans l’asthme du boulanger. : Constantin C, Quirce S, Grote M, Touraev A, Swoboda I, Stoecklinger A, Mari A, Thalhamer J, Heberle-Bors E, Valenta R.
Division of Immunopathology, Department of Pathophysiology, Center of Physiology, Pathophysiology, and Immunology, Medical University of Vienna, Vienna
dans J Immunol. 2008 Jun 1 ;180(11):7451-60
– Contexte :
- La sensibilisation IgE médiée à la farine de blé est une des causes les plus fréquentes d’asthme professionnel.
– Méthode :
- Une librairie d’ADNc a été élaborée à partir de grains de blé et screenée avec les IgE sériques de patients présentant un asthme du boulanger.
- Un clone de phage IgE réactif contenait un segment entier d’ADNc codant pour un allergène de masse moléculaire de 9.8 kDa et un point isoélectrique de 6.
- Selon les analyses de séquence, cela correspond à un membre de la famille des inhibiteurs de pomme de terre de type I, un groupe d’inhibiteurs de sérine protéinase, et se trouve être ainsi le premier allergène appartenant au groupe des protéines PR-6.
- Un recombinant de l’inhibiteur de protéinase du grain de blé a été exprimé par Escherichia coli et purifié jusqu’à homogénéité.
– Résultats :
- Selon l’analyse en dichroïsme circulaire, il s’agit d’une protéine soluble et spatialement conformée avec une forte stabilité thermique, contenant principalement des feuillets bêta, des enroulements aléatoires, et un élément d’hélice alpha.
- L’allergène recombinant a montré une activité allergénique au test d’histamine release par les basophiles et a réagi spécifiquement avec les IgE de 3 des patients avec asthme du boulanger sur un total de 22, mais n’a pas réagi avec les IgE des patients polliniques aux Graminées ni avec celles des patients présentant une allergie alimentaire au blé.
- On a produit des anticorps spécifiques de l’allergène ce qui a permis de localiser l’allergène en microscopie électronique « immunogold »dans les réserves de l’endosperme et dans la couche à aleurone du grain de blé.
- L’allergène est principalement exprimé dans les grains de blé mûrs et, malgré une identité de séquence d’approximativement 50%, a montré une absence de réactivité croisée avec des allergènes (homologues) issus d’aliments végétaux tels que le maïs, le riz, les haricots ou les pommes de terre.
– Conclusion :
- Le recombinant de l’inhibiteur de la sérine protéinase du blé, utilisé en combinaison avec d’autres allergènes spécifiques, peut être utile pour le diagnostic et le traitement de l’asthme du boulanger médié par les IgE.
