Réduction de l’allergénicité par altération de la structure tertiaire de l’allergène : une protéine mosaïque de Phl p 1 dédiée à la vaccination allergénique. : T. Ball 1 , B. Linhart 1 , K. Sonneck 2 , K. Blatt 2 , H. Herrmann 2 , P. Valent 2 , A. Stoecklinger 3 , C. Lupinek 1 , J. Thalhamer 3 , A. A. Fedorov 4 , S. C. Almo 4 , R. Valenta 1

1 Christian Doppler Laboratory for Allergy Research, Division of Immunopathology, Department of Pathophysiology, Center for Physiology, Pathophysiology and Immunology, Medical University of Vienna, Vienna ; 2 Division of Hematology and Hemostaseology, Department of Internal Medicine I, Vienna General Hospital, AKH, Medical University of Vienna, Vienna ; 3 Christian Doppler Laboratory for Allergy Diagnosis and Therapy, Department of Molecular Biology, University of Salzburg, Salzburg, Austria ; 4 Department of Biochemistry, Albert Einstein College of Medicine, NY, USA

dans Allergy
Volume 64 Issue 4, Pages 569 - 580

– Contexte :

• L’allergène majeur de la phléole, Phl p 1, ressemble aux épitopes du groupe I des allergènes des pollens de graminées et est reconnu par plus de 95% des patients allergiques aux pollens de Graminées.

– Objectif :

• Notre objectif était la construction, la purification et la caractérisation immunologique d’un dérivé génétiquement modifié de l’allergène majeur de la phléole, Phl p 1, destiné à l’immunothérapie spécifique.

– Méthodes :

• Une mosaïque protéique a été générée par réassemblage de PCR, expression de quatre ADNc (ADN complémentaire) codant pour des fragments de Phl p 1, et comparée à Phl p 1 naturel à l’aide de l’analyse de dichroïsme circulaire, de la capacité de fixation des IgE, du test d’activation des basophiles et de l’ELISA par compétition.
• Les réponses immunitaires au dérivé ont été étudiées sur des souris BALB/c.

– Résultats :

• Les patients allergiques aux pollens de Graminées présentaient une réduction de plus de 85% de la réactivité IgE à la mosaïque comparativement à l’allergène Phl p 1, le test d’activation des basophiles confirmait cette réduction de l’activité allergénique de la mosaïque.
• La mosaïque a également induit moins d’IgE spécifiques de Phl p 1que chez les souris immunisées par Phl p 1.
• Cependant, la vaccination de la souris et du lapin avec la mosaïque induit des IgG qui inhibent la liaison des IgE des patients à l’allergène natif, Phl p 1 induisait la dégranulation des basophiles.

– Conclusion :

• Nous avons développé une stratégie basée sur le réassemblage moléculaire rationnel afin de convertir l’un des allergènes le plus pertinent cliniquement sous forme d’un dérivé hypoallergénique dédié à la vaccination allergénique.