Une chaine légère de myosine (Lit v 3) : un nouvel allergène de crevette. : Rosalía Ayuso, MD, PhDa, Galina Grishina, MSa, Ludmilla Bardina, MSa, Teresa Carrillo, MD, PhDb, Carlos Blanco, MD, PhDc, María Dolores Ibáñez, MD, PhDd, Hugh A. Sampson, MDa, Kirsten Beyer, MDe

a Division of Allergy and Immunology and the Jaffe Food Allergy Research Institute, Mount Sinai School of Medicine, New York, NY
b Section of Allergy and Respiratory Diseases, Hospital Universitario Dr. Negrín, Las Palmas de Gran Canaria, Spain
c Section of Allergy, Hospital Universitario de la Princesa, Madrid, Spain
d Pediatric Allergy, Hospital del Niño Jesús, Madrid, Spain
e Department of Pediatric Pneumology and Immunology, University Children’s Hospital Charité, Berlin, Germany

dans JACI Volume 122, Issue 4, Pages 795-802

– Contexte :

• L’allergie aux fruits de mer est fréquente et ce trouble de longue durée persiste habituellement tout au long de la vie.
• Peu d’options sont disponibles pour le traitement et la prévention est la seule thérapie recommandée.

– Objectif :

• Nous avons cherché à identifier des allergènes de crustacés pouvant être utilisés de façon pertinente comme agents diagnostiques et immuno-thérapeutiques pour les sujets allergiques aux fruits de mer.

– Méthode :

• Trente-huit patients ont été sélectionnés sur la base de réactions allergiques immédiates aux crevettes et de niveaux croissants d’IgE sériques spécifiques.
• Les électrophorèses d’extraits de crevette à une et à deux dimensions ont été suivies par IgE immunoblotting.
• L’identification des protéines a été faite par spectrométrie de masse matricielle avec désorption-ionisation assistée par laser et séquençage Edman.
• Une banque d’ADNc a été produite à partir de crevettes blanches du Pacifique (Litopenaeus vannamei) et screenée avec les amorces conçues sur la base de séquences internes obtenues à partir de digestats tryptiques en deux dimensions.
• Des clones d’ADNc de pleine longueur ont été isolés à partir de la bibliothèque et séquencés.
• Une protéine recombinante a été exprimée et testée avec des sérums de sujets allergiques aux crevettes.

– Résultats :

• L’immunoblotting a mis en évidence une liaison IgE à une protéine de 20kDa par 21 des 38 sera (55%).
• La digestion tryptique de la protéine suivie d’une spectrométrie de masse complétée par des techniques de désorption/ionisation et séquençage a identifié cette protéine comme une chaine légère de myosine (MLC).
• Le screening de la librairie d’ADNc de crevette a abouti à l’isolement d’une nouvelle protéine d’ADNc.
• Une traduction d’un tableau de lecture ouverte a fourni la séquence d’acides aminés d’une nouvelle protéine allergénique de crevettes avec une grande similitude avec Bla g 8 (MLC de blatte).
• La protéine recombinante a été reconnue par 17 patients, confirmant l’allergénicité de la MLC de crevette.

– Conclusion :

• Nous avons identifié et cloné un nouvel allergène majeur de crevette, Lit v 3.0101, une protéine MLC.